核酸侧向流动检测(Nucleic Acid Lateral Flow Assay, NALFA)作为一种将分子生物学扩增技术的高灵敏度与侧流层析技术的便捷性相结合的创新工具。核酸是生物学和医学研究中重要生物标志物。与蛋白质或活细胞相比,核酸在恶劣环境中更易保持完整性,并且可以通过核酸扩增显著增强其发射信号。与传统的核酸检测方法相比,NALFA的成本更低、操作更简便,因此在核酸检测领域得到了越来越广泛的应用。
一个典型的核酸侧流层析试纸条包含样品垫、结合垫、NC膜(包被有检测线T线和质控线C线)以及吸水垫。核心机制是通过层析液的引导,使带有特定标记的核酸扩增产物在硝酸纤维素膜(NC膜)上发生定向移动,并在此过程中完成特异性捕获与信号显现。根据信号输出方式,核酸侧向流动检测产品可分为显色类(如胶体金/乳胶微球试纸条)和荧光类(如荧光微球/量子点试纸条。显色类的最大优势是结果可裸眼判读,完全摆脱了对检测仪器的依赖。相比显色类,使用荧光物质作为信号介质的荧光类检测需要配备便携式荧光读取仪,但灵敏度显著更高,且具备进行半定量或定量分析的潜力。
NALFA通常与无需热循环仪的等温扩增方法,如重组酶聚合酶扩增(RPA/RAA)、环介导等温扩增(LAMP)等技术联用。等温扩增无需昂贵的热循环仪,基于等温扩增的NALFA的完整测试过程可以在便携式设备中于几十分钟内完成。随着基因编辑技术的发展,CRISPR/Cas系统的反式切割活性被用于核酸检测。被CRISPR/Cas系统识别切割后的产物在试纸条上呈现出与未切割状态截然不同的带型分布。这一组合极大地提升了检测的特异性与灵敏度。
核酸侧向流动检测以其高特异性、操作简便、响应迅速的特点,被广泛应用于生物技术、农业和食品安全等诸多领域。艾普东生物引入并提供高品质、批次稳定的侧流检测相关耗材及全套解决方案,协助广大科研用户与工业客户优化现场检测方案。使用这些产品进行分析的过程便携,且可在短时间内完成。
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