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产品概况
- 福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织和细针穿刺活检(FNA)是病理学家数十年来常用的组织样本存档来源。它能够使组织样本在室温下长期保存,非常方便。由于长期以来一直是标准方法,它也是生物研究材料的主要来源。分子肿瘤诊断的关键步骤之一是获取高质量的基因组DNA。对FFPE或FNA来源的DNA进行突变分析有助于诊断大多数实体瘤。利用FFPE DNA进行表皮生长因子受体(EGFR)、KRAS基因、NRAS基因以及用于检测显著突变基因热点的二代测序等检测,对于确定具体的癌症治疗方案至关重要。然而,从这些组织中提取DNA是一项挑战,这主要是由于福尔马林固定会导致蛋白质和DNA之间以及不同的DNA链之间发生交联。因此,纯DNA常常受到广泛的损伤和片段化。片段化的程度取决于组织类型、样本保存时间和特定的固定方法。这些特性会给下游应用带来问题,而许多下游应用都使用PCR技术。因此,从FFPE组织中提取DNA必须成功提取高度片段化的DNA,并逆转福尔马林固定产生的交联。为了提取足够的基因组DNA(gDNA)用于下游分析,几种市售的核酸提取试剂盒至少需要一张10µm厚的起始材料。由于这些组织块取自人类患者,提取试剂盒至关重要,因为它决定了所需的载玻片大小以及每个FFPE组织块可进行的分析次数。由于某些储存的组织太小,无法满足这一条件,因此这一限制降低了可应用的范围。此外,使用这些试剂盒进行DNA提取可能耗时较长,“结合-洗涤-洗脱”步骤可能会导致大量的DNA损失。 BcMag™一步法FFPE和FNA DNA纯化试剂盒旨在高效、连续地从2µm至5µm的福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织或细针穿刺活检样本中提取总核酸。该试剂盒采用我们独特的磁珠,可在水性缓冲液中高效去除FFPE组织样本中的石蜡,同时对组织进行复水。该方法避免了使用易燃且有异味的二甲苯或d-柠檬烯,也省去了从通常难以辨认的组织沉淀物中清除有机溶剂的繁琐步骤(这些沉淀物通常用于脱蜡)。此外,该试剂盒的独特之处在于,其专有的磁珠可在无需DNA提取的情况下,一步去除样本中的PCR抑制剂。因此,它提高了核酸产量,并避免了传统DNA提取技术中耗时的“结合-洗涤-洗脱”步骤造成的DNA损失。样品裂解后,这种简便的一步纯化技术非常适合同时处理96个样品,可在30分钟内制备出纯DNA。纯化的基因组DNA具有最高的完整性,可用于各种下游应用,例如qPCR、突变筛选、微阵列分析、测序、Southern印迹和SNP分析。
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产品特性
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应用说明一步即可从福尔马林固定、石蜡包埋的组织或细针穿刺活检样本中提取高质量核酸。
*仅供研究使用
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产品概况